微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)之無(wú)菌環(huán)境的要求
發(fā)布時(shí)間:2021-12-01瀏覽：1576
無(wú)菌環(huán)境是指人們用物理的或化學(xué)的方法，在某一可控的空間內(nèi)使微生物數(shù)量降低到最低限度，接近于無(wú)菌的一種空間。無(wú)菌室或無(wú)菌柜、凈化工作臺(tái)、生物安全柜、隔離器等都是這樣的空間。其中隔離器是現(xiàn)代化的無(wú)菌操作最安全的裝置。
無(wú)菌環(huán)境，其含義只是相對(duì)而言，嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境是很難達(dá)到的。目前對(duì)無(wú)菌程度的檢測(cè)方法是以一定容積空氣中所含≥0.5 μm的微粒數(shù)及活菌數(shù)來(lái)評(píng)定環(huán)境中凈化空氣的程度。我國(guó)藥品生產(chǎn)管理規(guī)范的空氣凈化級(jí)別規(guī)定為四級(jí)。
空氣中含有≥0.5 μm的微粒數(shù)不等于微生物的活細(xì)胞數(shù)。只有在相應(yīng)的凈化級(jí)別的區(qū)域內(nèi)所測(cè)得的菌落數(shù)才是微生物的活細(xì)胞數(shù)，方可衡量無(wú)菌程度。
無(wú)菌室的無(wú)菌程度，根據(jù)工作性質(zhì)、內(nèi)容的不同而有區(qū)別。無(wú)菌灌裝、無(wú)菌取樣、無(wú)菌檢測(cè)的無(wú)菌室，其無(wú)菌程度要求高，一般無(wú)菌室的無(wú)菌程度要求稍低。
無(wú)菌室的無(wú)菌程度，常用的測(cè)定方法為取營(yíng)養(yǎng)肉湯瓊脂平板（內(nèi)徑9cm）、改良馬丁培養(yǎng)基平板（內(nèi)徑9cm）各3個(gè)，置無(wú)菌室的各工作位置上，開蓋暴露30min，分別在35～37℃培養(yǎng) 48h、25~28℃培養(yǎng)3~5天后計(jì)算菌落數(shù)。細(xì)菌和真菌總數(shù)不超過(guò)10個(gè)否則不能用于微生物限度檢查。