微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)之消毒與滅菌（三十九）
發(fā)布時(shí)間:2022-02-02瀏覽：1204
過濾除菌 通過微生物截留材料過濾的方法廣泛應(yīng)用于熱不穩(wěn)定溶液的滅菌，物理地截留溶液中含有的微生物。過濾器包含開放式或全封閉濾器。過濾介質(zhì)或?yàn)V膜的有效性取決于多孔材料孔徑的大小，還可能取決于過濾器對(duì)細(xì)菌吸附或過濾機(jī)制。有證據(jù)表明篩濾是其機(jī)制中較為重要的環(huán)節(jié)。應(yīng)避免使用纖維抽濾器，特別是混合石棉，除非無(wú)條件采用其他過濾法。在需要纖維抽濾時(shí)，在初始過濾后接著用非纖維抽濾。
濾膜器規(guī)格—濾膜孔徑的大小，由一個(gè)反映濾膜隔離規(guī)定微生物菌種的能力的比率來(lái)表示，而不由小孔的平均孔徑和標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)決定。滅菌用濾膜（用于截留主要雜質(zhì)微生物），在壓力不低于30 Psi（Psi每平方英寸磅，2.0巴）時(shí)，能100%的隔離107/cmi 個(gè)缺陷假單胞菌（Pseudomons diminuta，ATCC 19146）。這樣的濾膜通常為0.22 μm或0.2μm。該種規(guī)格的濾膜比率也規(guī)定了試劑或介質(zhì)必須經(jīng)過過濾滅菌（如眼膏和十四烷酸異丙酯）、細(xì)菌濾膜（也稱分析濾膜）標(biāo)注的規(guī)格為0.45μm，只對(duì)較大微生物有截留能力。對(duì)0.45μm規(guī)格的過濾尚無(wú)規(guī)定權(quán)威方法，這一規(guī)格取決于制造商的常規(guī)方法、0.45 μm 能截留粘質(zhì)沙雷菌（Seratia marescers，ATCC 14756）或缺陷假單胞菌培養(yǎng)物。測(cè)試壓力變化范圍從低值（對(duì)沙雷菌為5 Psi，0.33巴）到高值（50 Psi，3.4巴）。這是為無(wú)菌檢測(cè)規(guī)定的，要求較充分地微生物截留。供試品只被體積小的微生物污染的可能性較小。具有非常低的過濾率的濾膜應(yīng)用萊氏無(wú)膽支原體（Acholeplasma lilowmi）或其他支原體屬（Mycoplasma）菌株的培養(yǎng)物在壓力為7Psi（0.7巴）下測(cè)試，通常比率為0.1μm。當(dāng)通過其他方式確定時(shí)，基于微生物截留性的比率會(huì)變化，如采用不同直徑的近球形菌的截留，對(duì)特殊目的如過濾制品的性質(zhì)，可選擇正確比率的過濾器。一般用戶通常不可能重復(fù)對(duì)過濾能力的測(cè)試，而濾膜生產(chǎn)廠對(duì)每一批次制造的膜都要進(jìn)行微生物測(cè)試。
必須了解采用的過濾參數(shù)是否嚴(yán)重影響微生物截留效率，在過濾過程中也應(yīng)關(guān)注產(chǎn)品的一致性、藥品吸附、保護(hù)劑和其他添加劑、初始濾出液的內(nèi)毒素含量。
過濾的有效性也受過濾溶液的微生物含量的影響，故過濾前，溶液中微生物質(zhì)量的確定是過濾過程確認(rèn)的一個(gè)重要方面。此外，還要確認(rèn)如壓力、流量和濾器的特性等過濾過程參數(shù)。所以描述過濾截留能力的另一種方法是采用對(duì)數(shù)衰減值（log reduction value，LRV）。例如在上述條件下一個(gè)0.1μm 能截留一種菌株 107個(gè)微生物的過濾器將具有不低于7個(gè)LRV。
為達(dá)到滅菌目的，常用裝配有統(tǒng)稱孔徑率0.2μm或更小的膜來(lái)進(jìn)行，根據(jù)確認(rèn)的微生物每平方厘米濾膜表面不低于107個(gè)缺陷假單胞菌懸液的過濾來(lái)確認(rèn)。濾膜過濾器在使用前應(yīng)測(cè)初始的完整性，典型的測(cè)試方法是始沸點(diǎn)測(cè)試，擴(kuò)散氣流測(cè)試，壓力保持測(cè)試和前向流測(cè)試。這些測(cè)試應(yīng)與微生物截留相關(guān)。