常用的滅菌方法驗(yàn)證介紹-輻射滅菌
輻射滅菌 不能使用加熱滅菌的醫(yī)療設(shè)備、藥品和對(duì)環(huán)氧乙烷安全性的顧慮來(lái)越多采用輻射滅菌。輻射滅菌的獨(dú)特性主要是基本能控制被吸收的輻射劑量，也能精確測(cè)量。輻射僅導(dǎo)致極小溫度上升，但對(duì)某些級(jí)別和類(lèi)型的塑料、玻璃有影響。
輻射滅菌應(yīng)用的兩種離子是放射性同位素衰減產(chǎn)生的γ-射線和電子束輻射。無(wú)論種方法，都要確定達(dá)到無(wú)菌保證程度的輻射劑量，以及最小劑量和最大劑量之間對(duì)被滅菌制品的性質(zhì)是可接受的。
對(duì)γ-射線輻射過(guò)程的確認(rèn)，包括確認(rèn)制品材料的耐受性、產(chǎn)品裝載形式和完成滅容器的劑量分布（包括確定最小劑量和最大劑量的區(qū)域）、計(jì)時(shí)器設(shè)置及要求的滅菌劑量。對(duì)于電子輻射，還要確認(rèn)電壓、電流、傳輸速率和電子束掃描范圍的控制。
用y-射線輻照滅菌，要選定一個(gè)不破壞成分的有效滅菌劑量，美國(guó)藥典規(guī)定 25kGy 的作為要求無(wú)菌的制品的滅菌劑量。由于文明生產(chǎn)極大的降低了初始染菌程度，對(duì)器材、藥品、最終制劑采用較低一些劑量，一些國(guó)家采用20kGy 作為滅菌劑量，其他情況下高劑量是關(guān)鍵。為了確定低照射劑量的有效性，有必要確定制品微生物種群的自然抗輻射強(qiáng)度。必須使用化學(xué)劑量表確定產(chǎn)品裝載模式和最小最大吸收劑量分布。這類(lèi)劑量表通常是染色的塑料圓筒、片或方塊，顯示顏色深淺直接對(duì)應(yīng)于吸收輻射能量大小，并要仔細(xì)標(biāo)定。
確認(rèn)滅菌過(guò)程的吸收劑量，應(yīng)用生物指示劑短小芽孢桿菌（Bailus pumius，E601）與制品的混合來(lái)試驗(yàn)。部分試驗(yàn)循環(huán)方法提供的應(yīng)用數(shù)據(jù)確定生物指示劑的 D10值，以此用于推算吸收輻射劑量以確認(rèn)適當(dāng)?shù)奈⑸锎婊盥?。采用逐步增加輻射劑量?lái)建立一個(gè)劑量，使受該劑量照射的樣本不滅菌率近似1%。這雖不是最大滅菌劑量，但提供了利用樣本不滅菌率1%的產(chǎn)生劑量來(lái)推算滅菌劑量，同時(shí)也表示殘留微生物抗性種群的抗力系數(shù)。另一種過(guò)程基于不同的確定方法，即始于一個(gè)產(chǎn)生低于 50%樣本不滅菌率的劑量，在這一劑量下照射足夠多的樣本后，可獲得一系列微生物數(shù)段，那么每一個(gè)輻射抗力系數(shù)就確定了。然后用確定的抗力系數(shù)和 50%初始滅菌劑量計(jì)算出滅菌劑量。每一種滅菌劑量方法都應(yīng)有周期的復(fù)核過(guò)程。
在確定了最小輻射劑量和該劑量的照射結(jié)果（用化學(xué)或物理計(jì)量計(jì)）后，滅菌制品才能達(dá)到無(wú)菌保證的效果（包括使用劑量的確認(rèn)，生物指示劑和其他方法的使用）。
有文獻(xiàn)介紹短小芽孢桿菌（ATCC 14884或 CIP 3.83）用于2 kGy輻射滅菌，其D值約3kKGy，每種指示劑107~108個(gè)孢子。