微生物實驗技術(shù)之細菌的接種、分離、培養(yǎng)(十三)
發(fā)布時間:2021-12-20瀏覽:1373
根據(jù)細菌對氧與二氧化碳需要的情況,有以下幾種不同的培養(yǎng)方法:需氧培養(yǎng)法、厭氧培養(yǎng)法、微需氧培養(yǎng)法、二氧化碳培養(yǎng)法。
二氧化碳培養(yǎng)法 某些細菌,例如布魯菌等,需在5%~10%的 CO2環(huán)境中培養(yǎng)。在藥品的細菌檢驗中,若對某種營養(yǎng)性的動物臟器制劑檢出大量的金黃色葡萄球菌,并懷疑產(chǎn)有引起急性胃腸炎的腸毒素時,可將該菌種于肉湯培養(yǎng)基內(nèi),置 CO2環(huán)境中培養(yǎng),獲取腸毒素,供作動物試驗。
二氧化碳培養(yǎng)法如下∶
(1)二氧化碳培養(yǎng)箱法∶就是把接種過的培養(yǎng)基置于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),此為目前最佳的二氧化碳培養(yǎng)法。該箱內(nèi)的CO2由外部輸入,外部是一個裝有CO2的鋼瓶。箱內(nèi)的CO2含量和溫度,均能自動調(diào)節(jié),使用方便,效果良好。
(2)燭缸法∶此即微需氧培養(yǎng)法中的燭缸法。因燃燭自行熄滅時,缸內(nèi)約有5%~10%的CO2,供作培養(yǎng)。
(3)化學法∶是利用干燥缸或磨口標本缸進行。在缸口與蓋口涂勻凡士林后,分別將重碳酸鈉與濃鹽酸置于缸底,用量按缸的容積計算,每 L容積用重碳酸鈉0.4g與濃鹽酸 0.35 ml。置入接種過的培養(yǎng)基,立即蓋嚴密封。接著稍稍將缸傾斜,使重碳酸鈉與濃鹽酸接觸,約可生成5%~10%的CO2,置37℃培養(yǎng)。
燭缸法和化學法,均可在缸內(nèi)放一管 CO2指示劑,即溴麝香草酚藍指示劑,按0.1%碳酸鈉水溶液 100 ml 中加入0.5%溴麝香草酚藍溶液 2 ml 即配成。此指示劑在不同濃度的CO2環(huán)境中,可呈現(xiàn)不同的顏色。無CO2時呈藍色;5%CO2時呈藍綠色;10%CO2時呈綠色;15%CO2時呈綠黃色;20%CO2時呈黃色。顯色反應約需1h才能穩(wěn)定。