微生物實驗技術之細菌的接種、分離、培養(yǎng)(十二)
發(fā)布時間:2021-12-19瀏覽:1441
根據細菌對氧與二氧化碳需要的情況,有以下幾種不同的培養(yǎng)方法:需氧培養(yǎng)法、厭氧培養(yǎng)法、微需氧培養(yǎng)法、二氧化碳培養(yǎng)法。
微需氧培養(yǎng)法 此法是介于需氧培養(yǎng)與厭氧培養(yǎng)之間的一種培養(yǎng)方法。有的細菌,例如彎曲菌為微需氧菌,需氧不多,無氧又不能生長繁殖,要用微需氧培養(yǎng)法。
最佳的微需氧條件是5%O2、10%CO2、85%N2。
微需氧培養(yǎng)法有下列幾種:
(1)混合氣體法∶此法是利用厭氧菌培養(yǎng)罐進行,罐蓋上應具有雙相壓力計,可表示正負壓的。在裝進接種過的培養(yǎng)基后,密封罐蓋。先抽去罐內空氣至負壓 7.3×104 Pa(550 mmHg)處,輸入含5%02、10%CO2、85%N2的混合氣體,使罐內壓力恢復至零。如此重復進行一次。即可置于37℃培養(yǎng)。
(2)氣袋法∶這是利用厭氧菌簡易培養(yǎng)袋進行的方法。操作時只使用氣體發(fā)生管,不使用鈀粒催化劑管,使接種過的培養(yǎng)基在袋內有微需氧環(huán)境,置37℃培養(yǎng)。
(3)雙平板法∶是用兩個平板培養(yǎng)基,其一接種已知的兼性厭氧菌、例如變形桿菌,另一接種樣品或菌種,去掉兩個平板的蓋子,將二者相對合齊,用膠布粘封密閉,再放進密封不漏氣的容器內,置37℃培養(yǎng)。此法是由兼性厭氧菌生長的代謝作用,使小環(huán)境中的O2濃度下降和 CO2濃度上升,利用微需氧菌生長繁殖。
(4)燭缸法∶是用磨口標本缸或干燥缸進行。將缸口與缸蓋接觸面涂勻凡士林,置入已接種的培養(yǎng)基,再放進一小段點燃的蠟燭,蓋嚴密封。蠟燭在缸內燃燒至自行熄滅,消耗了氧氣并產生 CO2,形成微需氧狀態(tài),即可置 37℃培養(yǎng)。注意,燃燭要立穩(wěn),若傾倒熄滅則耗氧過少,達不到微氧狀態(tài)。