對(duì)于湖北省無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)學(xué)員來(lái)說(shuō)，關(guān)注醫(yī)療器械行業(yè)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)變化極其重要，如2025版中國(guó)藥典的變化就對(duì)無(wú)菌檢驗(yàn)方法和要求有微調(diào)。本文為大家介紹基于2025年版《中國(guó)藥典》，無(wú)菌檢查中濾膜沖洗量降至“5次×100ml”沖洗量，一起看正文。
湖北省無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)知識(shí)之無(wú)菌檢查中濾膜沖洗量變化（2025版藥典變化）
2025年版《中國(guó)藥典》通則1101《無(wú)菌檢查法》對(duì)濾膜沖洗參數(shù)的修訂，并非簡(jiǎn)單的數(shù)值調(diào)整，而是基于微生物檢測(cè)科學(xué)原理、國(guó)際藥典協(xié)調(diào)趨勢(shì)及藥品無(wú)菌保障風(fēng)險(xiǎn)控制理念的系統(tǒng)性?xún)?yōu)化——將每張濾膜沖洗總量從“最高1000ml”明確限定為“一般不得超過(guò)5次，每次100ml，總沖洗量不超過(guò)500ml”，且即使方法適用性試驗(yàn)證實(shí)未能完全消除供試品抑菌性，也嚴(yán)禁突破該上限。這一變化的核心邏輯的本質(zhì)是解決傳統(tǒng)“大量沖洗”策略中“抑菌性消除”與“微生物存活”二者的矛盾關(guān)系，其科學(xué)依據(jù)可從三個(gè)維度展開(kāi)。
（一）規(guī)避過(guò)度沖洗導(dǎo)致的微生物損傷與假陰性風(fēng)險(xiǎn)
傳統(tǒng)無(wú)菌檢查中，部分實(shí)驗(yàn)室針對(duì)強(qiáng)抑菌性供試品（如抗生素類(lèi)注射劑、含防腐劑的眼用制劑），常通過(guò)增加沖洗量（甚至超過(guò)1000ml）來(lái)試圖徹底去除抑菌成分，但該操作存在顯著的微生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)微生物學(xué)特性研究，當(dāng)沖洗液通過(guò)濾膜的總量超過(guò)500ml時(shí)，濾膜表面產(chǎn)生的剪切力會(huì)從約30dyn/cm2升至60dyn/cm2以上，這種機(jī)械力會(huì)導(dǎo)致革蘭陰性菌（如銅綠假單胞菌、大腸埃希菌）的外膜結(jié)構(gòu)破損，使菌體進(jìn)入“可培養(yǎng)但不可檢出”（VBNC）狀態(tài)；對(duì)于真菌孢子（如白色念珠菌、黑曲霉），過(guò)量沖洗會(huì)破壞其細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致孢子萌發(fā)率下降40%以上；而對(duì)于厭氧菌（如生孢梭菌），長(zhǎng)時(shí)間沖洗會(huì)導(dǎo)致濾膜微環(huán)境中氧氣濃度升高，抑制其厭氧代謝過(guò)程，最終表現(xiàn)為培養(yǎng)后無(wú)微生物生長(zhǎng)的假陰性結(jié)果。2025年版藥典通過(guò)限定沖洗總量，從根本上避免了這種因操作不當(dāng)導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果失真，確保濾膜上截留的目標(biāo)微生物能在后續(xù)培養(yǎng)中正常生長(zhǎng)，符合《藥品微生物檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性保證指導(dǎo)原則》（9203）中“檢測(cè)方法不得干擾微生物存活”的核心要求。
（二）實(shí)現(xiàn)與國(guó)際藥典及技術(shù)指南的協(xié)調(diào)統(tǒng)一
從全球無(wú)菌檢查標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)趨勢(shì)來(lái)看，2025年版藥典的修訂是對(duì)ICH Q4B（藥典協(xié)調(diào)）倡議的響應(yīng)。美國(guó)藥典（USP）<71>《無(wú)菌檢查》早于2015年即明確“每張濾膜沖洗次數(shù)不得超過(guò)5次，每次沖洗量100ml”，且規(guī)定若該條件下抑菌性未消除，需調(diào)整中和劑或?yàn)V膜材質(zhì)，而非增加沖洗量；歐洲藥典（EP）10.0版2.6.1《無(wú)菌檢查》雖未明確次數(shù)限制，但要求“總沖洗量不得超過(guò)500ml，以避免微生物損傷”；英國(guó)藥典（BP）2020年版無(wú)菌檢查通則與EP保持一致，強(qiáng)調(diào)“沖洗量應(yīng)基于方法適用性驗(yàn)證確定，且不得導(dǎo)致微生物流失”；日本藥典（JP） XVIII版雖未明確總量限制，但在《無(wú)菌檢查法實(shí)施指南》中建議“每次沖洗量100ml，沖洗次數(shù)3-5次，總沖洗量控制在500ml以?xún)?nèi)”。2025年版中國(guó)藥典的修訂，使我國(guó)無(wú)菌檢查標(biāo)準(zhǔn)與USP、EP、BP、JP等國(guó)際主流藥典的核心參數(shù)實(shí)現(xiàn)統(tǒng)一，減少了藥品進(jìn)出口檢驗(yàn)中的技術(shù)壁壘，符合我國(guó)藥品“走出去”戰(zhàn)略中“標(biāo)準(zhǔn)國(guó)際接軌”的要求。
（三）推動(dòng)無(wú)菌檢查從“末端檢驗(yàn)”向“過(guò)程控制”轉(zhuǎn)型
傳統(tǒng)沖洗量無(wú)明確上限的設(shè)定，易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室過(guò)度依賴(lài)“大量沖洗”這一單一手段，忽視對(duì)供試品抑菌特性的前期研究、中和劑的科學(xué)選擇及濾膜材質(zhì)的優(yōu)化。2025年版藥典通過(guò)限定沖洗參數(shù)，倒逼實(shí)驗(yàn)室將工作重心前移至方法開(kāi)發(fā)階段——在進(jìn)行無(wú)菌檢查方法適用性試驗(yàn)時(shí)，需系統(tǒng)研究供試品的抑菌機(jī)制（如β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的細(xì)胞壁合成抑制、喹諾酮類(lèi)的DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制），針對(duì)性選擇中和劑（如β-內(nèi)酰胺酶用于青霉素類(lèi)、硫酸鎂用于喹諾酮類(lèi)），并優(yōu)化濾膜材質(zhì)（如聚偏二氟乙烯（PVDF）膜用于高蛋白吸附性供試品、聚醚砜（PES）膜用于高粘度供試品），而非簡(jiǎn)單通過(guò)增加沖洗量解決問(wèn)題。這種轉(zhuǎn)型符合GMP“質(zhì)量源于設(shè)計(jì)（QbD）”理念，使無(wú)菌檢查不再是孤立的“末端檢驗(yàn)”，而是與供試品特性研究、方法驗(yàn)證、過(guò)程控制相結(jié)合的系統(tǒng)性質(zhì)量控制環(huán)節(jié)，最終提升藥品無(wú)菌保障的整體水平。
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