常用體外診斷試劑的基本原理
按照檢驗(yàn)方法，臨床診斷試劑大致可分為臨床生化檢測(cè)試劑、免疫學(xué)和血清學(xué)檢測(cè)試劑血液學(xué)及細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)試劑、微生物學(xué)檢測(cè)試劑、體液排泄物及脫落細(xì)胞的檢測(cè)試劑、分子生物學(xué)診斷試劑等種類。我們就其中主要的臨床生化、免疫學(xué)、細(xì)胞學(xué)和基因診斷試劑的基本原理進(jìn)行闡述。
免疫酶技術(shù)（immunoenzymatic technique）
(1)生物素－親和素放大系統(tǒng)(biotin - avidin system, BAS) 通過(guò)將酶標(biāo)記在生物素或親和素上，借助生物素與親和素的高親和力和生物素能與抗體結(jié)合的特點(diǎn)應(yīng)用于ELISA,顯著提高了檢測(cè)的敏感性。
（2)雙表位ELISA (two-site ELISA) 其方法同雙抗體夾心法，只是將包被的抗體和酶標(biāo)抗體換成針對(duì)兩個(gè)不同抗原決定族的單抗，用于檢測(cè)單抗的親和性及表位特異性，亦可用于標(biāo)本中抗原的快速檢測(cè)，即在試驗(yàn)時(shí)可將待測(cè)抗原與酶標(biāo)單抗同時(shí)加入反應(yīng)體系，減少檢測(cè)步驟。
(3)斑點(diǎn)免疫滲濾試驗(yàn)(dot immunofiltration assay, DIFA)其原理與ELISA相同，但以微孔膜(如硝酸纖維素膜、尼龍膜等)代替聚苯乙烯板作載體。試驗(yàn)時(shí)，將包被有抗原或抗體的微孔濾膜貼置于吸水材料上，依次滴加標(biāo)本、酶結(jié)合物、底物，分別進(jìn)行洗滌，多余的標(biāo)本和酶標(biāo)抗體及洗滌液等可滲濾人吸水材料中，最后陽(yáng)性標(biāo)本在膜上呈現(xiàn)著色斑點(diǎn)。
(4) 酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印漬法 該法將免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)與酶標(biāo)技術(shù)相結(jié)合，有利于分析和檢測(cè)更加復(fù)雜的抗原成分。酶聯(lián)免疫電轉(zhuǎn)移印漬法分三階段進(jìn)行:第一階段為SDS -聚丙烯酰胺凝膠電泳，先將抗原分成不同的區(qū)帶(肉眼不可見(jiàn));第二階段為轉(zhuǎn)移電泳，即將凝膠上的電泳區(qū)帶經(jīng)電泳轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上:第三階段為酶免疫定位，用特異性抗體和酶標(biāo)抗抗體作間接ELISA,陽(yáng)性區(qū)帶呈顯色反應(yīng)。