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一般情況下,蒸汽滅菌可用嗜熱脂肪芽孢桿菌的芽孢,干熱和環(huán)氧乙烷滅菌可用枯草芽泡桿菌(Bils subilis)的芽孢,短小芽孢桿菌(Boclus pumnilus)合適菌株的芽孢可用于輻射滅菌的監(jiān)測。
原始微生物孢子懸液的制備,要求有適當(dāng)?shù)闹苽涑绦颍ㄈ后w培養(yǎng),收獲和保護(hù)胞子的懸液。原始孢子懸液主要含有非活動性(非芽生)的孢子,一直保持在非營養(yǎng)性液體中。把生物指示菌放在含有培養(yǎng)液的包被中,該包被的設(shè)計要對滅菌基質(zhì)的穿透力具有最低程度的抗性,特別是所用的生物指示劑要與快速滅菌蒸汽相接觸。在任何部位放置生物指示劑要注意位置,即直立、旁側(cè)、以確保滅菌基質(zhì)的最大穿透力。生物指示劑的制備要保證它最初活孢子數(shù)及活孢子數(shù)對滅菌過程的抗力兩種功能。因此,要注意生物指示劑所含有的活孢子數(shù)及在有效期內(nèi)活孢子的抗力。
每種形式的標(biāo)準(zhǔn)生物指示劑,對其應(yīng)用都應(yīng)有明確的規(guī)定。在使用生物指示劑過程中,要符合所規(guī)定的要求和條件,僅了解芽孢的抗性參數(shù)是不夠的,要證實(shí)在使用中所采用的條件及實(shí)際結(jié)果。
操作:一般是將生物指示劑放在熱力或氣體、射線滅菌最不易達(dá)到的部位,每次不應(yīng)少于5片,上層和中層的中央部位各一片,下層前中后各1片,滅菌完畢,隨物品取出生物指示劑,以無菌操作,將包好的菌片取出,各加至含溴甲酚紫葡萄糖胨液體培養(yǎng)基1管,嗜熱脂肪芽孢桿菌在55~60℃培養(yǎng) 24~48h初步觀察,5天后判斷結(jié)果。如未長菌,判本批制品或物品滅菌合格。如有菌生長,可使培養(yǎng)基變酸,指示劑由紫藍(lán)色變黃色。若有1管長菌,判本批制品或物品滅菌不合格。