醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)是利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。細(xì)菌內(nèi)毒素是在革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁中發(fā)現(xiàn)的脂多糖 (LPS)。當(dāng)內(nèi)毒素進(jìn)入血液或 CSF（腦脊液）時(shí)會引起發(fā)熱，因此也稱為熱原。在發(fā)布無菌產(chǎn)品之前，測試細(xì)菌內(nèi)毒素是必不可少的，尤其是在制藥行業(yè)。細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原測試是在藥物和與心血管、淋巴系統(tǒng)或腦脊液相關(guān)的醫(yī)療設(shè)備等醫(yī)療效果釋放之前對內(nèi)毒素進(jìn)行的體外測試。
一、醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)原理
利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝聚反應(yīng)的機(jī)制，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。如經(jīng)檢驗(yàn)證實(shí)供試品對細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)有不能排除的干擾作用則不適宜采用本試驗(yàn)。本試驗(yàn)操作過程應(yīng)防止內(nèi)毒素的污染。
在使用一批新的鱟試劑進(jìn)行供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查或供試品干擾試驗(yàn)前，實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)。目的為考察鱟試劑的靈敏度是否準(zhǔn)確，同時(shí)也考查檢驗(yàn)人員操作方法是否正確及試驗(yàn)條件是否符合規(guī)定。
二、醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)步驟
細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備---待復(fù)核鱟試劑的準(zhǔn)備----加樣----觀察并記錄結(jié)果將試管架。
溶解鱟試劑及混勻供試品和鱟試劑時(shí)，不要劇烈振蕩避免產(chǎn)生氣泡；試驗(yàn)過程中應(yīng)注意更換吸頭，以避免檢查用水的污染及溶液的交叉污染。
由于凝集反應(yīng)是不可逆的，所以在反應(yīng)過程中及觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)注意不要使試管受到振動，以免使凝膠破碎產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
從水浴或恒溫器中輕輕取出，避免振動，將每管拿出緩緩倒轉(zhuǎn) 180°觀察，若管內(nèi)形成凝膠，并且凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽性，記錄為（＋）；未形成凝膠或形成的凝膠不堅(jiān)實(shí)、變形并從管壁滑脫者為陰性，記錄為（-）。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動造成假陰性結(jié)果。
結(jié)果判斷：當(dāng)λc 在 0.5~2.0 λ（包括 0.5 λ 和 2.0 λ）時(shí)判定該批鱟試劑靈敏度復(fù)核合格，可用于干擾試驗(yàn)和供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，并以λ（標(biāo)示靈敏度）為該批鱟試劑的靈敏度。
三、供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查
在細(xì)菌內(nèi)毒素檢查中，每批供試品必須做2支供試品管和2支供試品陽性對照，同時(shí)每次試驗(yàn)須做2支陽性對照和2支陰性對照。
四、醫(yī)療器械細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)
（1）國內(nèi)法規(guī)
《中國藥典》2020年版 第四部1143 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法
醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法 GB/T 14233.2-2005
（2）國外法規(guī)
美國藥典細(xì)菌內(nèi)毒素測試 42-NF37:2020
英國藥典 BP 2019 . 附錄 XIV C
美國藥典細(xì)菌內(nèi)毒素測試 USP–NF 2022
歐洲藥典 9.5 2.6.14
歐洲藥典 10.8 2.6.14。
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