微生物實驗技術之細菌的接種、分離、培養(yǎng)(三)
發(fā)布時間:2021-12-10瀏覽:1405
接種技術
接種的技術方法有多種,根據接種的目的和使用的培養(yǎng)基不同,分別采用。接種時經常使用的接種環(huán)或接種針,在每次使用的前后均應燒灼滅菌。有的接種技術,要用無菌吸管或無菌注射器進行。所有的接種技術方法,基本的程序相同,即接種環(huán)燒灼并冷卻或無菌吸管→沾取培養(yǎng)物或吸取樣品稀釋液→接種培養(yǎng)基中(包括拔塞或開蓋,接種后立即塞塞或蓋蓋)→接種環(huán)燒灼后放置或吸管置于消毒液中。
半固體培養(yǎng)基接種法 接種半固體培養(yǎng)基,用于觀察細菌的動力或保存菌種。持接種針沾取菌落或菌液,向培養(yǎng)基表面中央直刺至管底,(切不可將接種針在培養(yǎng)基內左右移動),再按原路線退出,即成。此種技術稱為穿刺接種法。培養(yǎng)后,有鞭毛的細菌,沿穿刺線向四周擴散生長,可被觀察到,顯示有動力。
對作鑒別試驗用的明膠、葡萄糖半固體等培養(yǎng)基,也用穿刺接種。但對醋酸鉛培養(yǎng)基是在管的內壁穿刺接種2~3次,利于觀察培養(yǎng)結果。
對既作純培養(yǎng),又作生化初篩的 TSI和 KIA瓊脂,因其為高層斜面,如上述用接種針從平板上沾取可疑菌的單個菌落,從斜面正中垂直穿刺種人至管底,再由原路退出,在斜面上蜿蜒劃線接種,但勿使針尖劃破斜面。對此種高層斜面的接種,也可先在斜面接種,再向底層穿刺。